凝膠成像系統(tǒng)的四個(gè)基本選購(gòu)原則(一)
如何從紛繁的市場(chǎng)上選擇到一款好的成像設(shè)備呢？很多號(hào)稱(chēng)-的設(shè)備是否真的能夠打滿分呢？擁有一臺(tái)好的、運(yùn)行穩(wěn)定的設(shè)備是實(shí)驗(yàn)者的心愿。下面的文章就向您介紹選擇成像系統(tǒng)的“四個(gè)基本選購(gòu)原則”。
原則一：
“只選對(duì)的，不選貴的”市場(chǎng)上各品牌、各型號(hào)的成像儀林林種種，但是從成像原理上可以分成兩大類(lèi)，分別是拍照成像和掃描成像。拍照成像簡(jiǎn)單說(shuō)就是樣品和相機(jī)的相對(duì)位置不動(dòng)，可以進(jìn)行單次成像或多次成像；掃描成像則是相機(jī)對(duì)樣品進(jìn)行局部成像，然后通過(guò)樣品或相機(jī)的移動(dòng)對(duì)整個(gè)樣品進(jìn)行成像。拍照成像目前主要采用CCD相機(jī)成像，由于可以設(shè)置不同的曝光時(shí)間，常被用來(lái)進(jìn)行微弱的化學(xué)發(fā)光及生物發(fā)光的成像。而掃描成像則由于精度高、重復(fù)性好被廣泛用于大型樣品以及多通道成像中?？梢哉f(shuō)，對(duì)于大型樣品或多通道應(yīng)用，能選擇掃描成像的，盡量不要選擇拍照成像。原理搞清楚了，選擇起來(lái)就簡(jiǎn)單了。不同的原理導(dǎo)致了不同應(yīng)用的*佳選擇，所以千萬(wàn)不要相信什么“全能王”之類(lèi)的鬼話，沒(méi)有任何一款機(jī)器可以通吃所有應(yīng)用領(lǐng)域。
下面就實(shí)驗(yàn)室*常見(jiàn)的一些應(yīng)用簡(jiǎn)單的說(shuō)明選擇的依據(jù)：核酸電泳凝膠：一般此類(lèi)凝膠都采用EB染色、紫外激發(fā)，而且凝膠較小。推薦采用一般的凝膠成像設(shè)備即可完成。蛋白電泳凝膠：一般此類(lèi)凝膠采用考染或銀染，白光透射成像。對(duì)于小型凝膠您可以選擇一般的凝膠成像設(shè)備，但是對(duì)于大型凝膠，特別是雙向電泳凝膠，由于CCD拍照成像會(huì)有幾何扭曲，而且透鏡效應(yīng)也會(huì)導(dǎo)致不同區(qū)域的信號(hào)強(qiáng)度差異，另外CCD拍照也無(wú)法保證不同凝膠的成像參數(shù)保持一致，因此掃描成像是*好選擇。轉(zhuǎn)印膜：這個(gè)稍微有些復(fù)雜。一般轉(zhuǎn)印膜有比色法顯色、同位素、化學(xué)發(fā)光和熒光等不同檢測(cè)手段。比色法顯色就是產(chǎn)生有顏色的條帶或斑點(diǎn)，一般采用普通的凝膠成像設(shè)備即可。同位素可以采用壓膠片曝光的方法，但是費(fèi)時(shí)、費(fèi)力而且容易過(guò)飽和。比較通用的方法是由FujiFilm在1981年發(fā)明的磷屏成像技術(shù)，獲得信號(hào)潛影的磷屏通過(guò)激光掃描就可以獲取同位素的信號(hào)。而化學(xué)發(fā)光是目前*常用的蛋白印跡的檢測(cè)手段，無(wú)疑，冷CCD拍照成像對(duì)這種微弱的光信號(hào)是*合適的。熒光是所有這些檢測(cè)手段中*令人贊嘆的和*有前景的。這不僅僅是因?yàn)闊晒馊玖暇哂?寬的動(dòng)態(tài)范圍，而且還在于它能夠?yàn)槲覀兲峁┒嗤返臋z測(cè)途徑（同樣適用于凝膠）。當(dāng)然，您可以使用單一熒光檢測(cè)，這時(shí)您對(duì)凝膠成像設(shè)備的要求就包括了新的激光光源和相應(yīng)的濾光片。
如果您是一個(gè)**主義者，或者您需要對(duì)鄰近或重疊的目標(biāo)分子進(jìn)行成像，那么多通道熒光檢測(cè)是您的不二之選。這時(shí)掃描成像優(yōu)良是*佳選擇，這樣選擇不僅僅是因?yàn)閽呙璩上衲軌驇?lái)更高的靈敏度和分辨率，更重要的是，不同通道之間沒(méi)有幾何扭曲，擬合性好。微孔板及其他特殊需求：對(duì)于拍照成像而言，由于幾何扭曲的問(wèn)題，對(duì)微孔板成像就變得比較復(fù)雜了，一般必須一個(gè)專(zhuān)用的校正裝置才可完成。當(dāng)然，如果采用掃描成像一般不需要任何額外附件。很多實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)在都對(duì)小動(dòng)物成像非常感興趣，然而對(duì)小動(dòng)物進(jìn)行真的不是一件簡(jiǎn)單的事，一方面小動(dòng)物需要進(jìn)行麻醉和固定；另一方面還需要對(duì)信號(hào)位置進(jìn)行三維定位。因此，能同時(shí)提供功能、代謝和解剖圖像的PET/CT是進(jìn)行這類(lèi)成像的*有力的工具。
原則二：
實(shí)踐是檢驗(yàn)真理的標(biāo)準(zhǔn)好用才是硬道理。任憑你說(shuō)得天花亂墜，拿來(lái)我試試，不就什么都清楚了?，F(xiàn)在多數(shù)廠商都提供Demo機(jī)服務(wù)，還有技術(shù)人員現(xiàn)場(chǎng)答疑解惑，那就請(qǐng)各位上場(chǎng)，，誰(shuí)的性能好，價(jià)格優(yōu)，那我就要誰(shuí)的。當(dāng)然，我們的實(shí)際測(cè)試結(jié)果僅僅是針對(duì)我們自己的樣品和現(xiàn)場(chǎng)demo的機(jī)器而已。我們不能據(jù)此對(duì)相關(guān)品牌和相關(guān)型號(hào)做太多評(píng)判。由于具體應(yīng)用的限制、操作技巧的差異以及可能的儀器狀態(tài)的區(qū)別，我們有可能沒(méi)有給出公允的評(píng)價(jià)。但無(wú)論如何，這些訊息對(duì)我們采購(gòu)者和使用者來(lái)說(shuō)都是非常重要的。
原則一：
“只選對(duì)的，不選貴的”市場(chǎng)上各品牌、各型號(hào)的成像儀林林種種，但是從成像原理上可以分成兩大類(lèi)，分別是拍照成像和掃描成像。拍照成像簡(jiǎn)單說(shuō)就是樣品和相機(jī)的相對(duì)位置不動(dòng)，可以進(jìn)行單次成像或多次成像；掃描成像則是相機(jī)對(duì)樣品進(jìn)行局部成像，然后通過(guò)樣品或相機(jī)的移動(dòng)對(duì)整個(gè)樣品進(jìn)行成像。拍照成像目前主要采用CCD相機(jī)成像，由于可以設(shè)置不同的曝光時(shí)間，常被用來(lái)進(jìn)行微弱的化學(xué)發(fā)光及生物發(fā)光的成像。而掃描成像則由于精度高、重復(fù)性好被廣泛用于大型樣品以及多通道成像中?？梢哉f(shuō)，對(duì)于大型樣品或多通道應(yīng)用，能選擇掃描成像的，盡量不要選擇拍照成像。原理搞清楚了，選擇起來(lái)就簡(jiǎn)單了。不同的原理導(dǎo)致了不同應(yīng)用的*佳選擇，所以千萬(wàn)不要相信什么“全能王”之類(lèi)的鬼話，沒(méi)有任何一款機(jī)器可以通吃所有應(yīng)用領(lǐng)域。
下面就實(shí)驗(yàn)室*常見(jiàn)的一些應(yīng)用簡(jiǎn)單的說(shuō)明選擇的依據(jù)：核酸電泳凝膠：一般此類(lèi)凝膠都采用EB染色、紫外激發(fā)，而且凝膠較小。推薦采用一般的凝膠成像設(shè)備即可完成。蛋白電泳凝膠：一般此類(lèi)凝膠采用考染或銀染，白光透射成像。對(duì)于小型凝膠您可以選擇一般的凝膠成像設(shè)備，但是對(duì)于大型凝膠，特別是雙向電泳凝膠，由于CCD拍照成像會(huì)有幾何扭曲，而且透鏡效應(yīng)也會(huì)導(dǎo)致不同區(qū)域的信號(hào)強(qiáng)度差異，另外CCD拍照也無(wú)法保證不同凝膠的成像參數(shù)保持一致，因此掃描成像是*好選擇。轉(zhuǎn)印膜：這個(gè)稍微有些復(fù)雜。一般轉(zhuǎn)印膜有比色法顯色、同位素、化學(xué)發(fā)光和熒光等不同檢測(cè)手段。比色法顯色就是產(chǎn)生有顏色的條帶或斑點(diǎn)，一般采用普通的凝膠成像設(shè)備即可。同位素可以采用壓膠片曝光的方法，但是費(fèi)時(shí)、費(fèi)力而且容易過(guò)飽和。比較通用的方法是由FujiFilm在1981年發(fā)明的磷屏成像技術(shù)，獲得信號(hào)潛影的磷屏通過(guò)激光掃描就可以獲取同位素的信號(hào)。而化學(xué)發(fā)光是目前*常用的蛋白印跡的檢測(cè)手段，無(wú)疑，冷CCD拍照成像對(duì)這種微弱的光信號(hào)是*合適的。熒光是所有這些檢測(cè)手段中*令人贊嘆的和*有前景的。這不僅僅是因?yàn)闊晒馊玖暇哂?寬的動(dòng)態(tài)范圍，而且還在于它能夠?yàn)槲覀兲峁┒嗤返臋z測(cè)途徑（同樣適用于凝膠）。當(dāng)然，您可以使用單一熒光檢測(cè)，這時(shí)您對(duì)凝膠成像設(shè)備的要求就包括了新的激光光源和相應(yīng)的濾光片。
如果您是一個(gè)**主義者，或者您需要對(duì)鄰近或重疊的目標(biāo)分子進(jìn)行成像，那么多通道熒光檢測(cè)是您的不二之選。這時(shí)掃描成像優(yōu)良是*佳選擇，這樣選擇不僅僅是因?yàn)閽呙璩上衲軌驇?lái)更高的靈敏度和分辨率，更重要的是，不同通道之間沒(méi)有幾何扭曲，擬合性好。微孔板及其他特殊需求：對(duì)于拍照成像而言，由于幾何扭曲的問(wèn)題，對(duì)微孔板成像就變得比較復(fù)雜了，一般必須一個(gè)專(zhuān)用的校正裝置才可完成。當(dāng)然，如果采用掃描成像一般不需要任何額外附件。很多實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)在都對(duì)小動(dòng)物成像非常感興趣，然而對(duì)小動(dòng)物進(jìn)行真的不是一件簡(jiǎn)單的事，一方面小動(dòng)物需要進(jìn)行麻醉和固定；另一方面還需要對(duì)信號(hào)位置進(jìn)行三維定位。因此，能同時(shí)提供功能、代謝和解剖圖像的PET/CT是進(jìn)行這類(lèi)成像的*有力的工具。
原則二：
實(shí)踐是檢驗(yàn)真理的標(biāo)準(zhǔn)好用才是硬道理。任憑你說(shuō)得天花亂墜，拿來(lái)我試試，不就什么都清楚了?，F(xiàn)在多數(shù)廠商都提供Demo機(jī)服務(wù)，還有技術(shù)人員現(xiàn)場(chǎng)答疑解惑，那就請(qǐng)各位上場(chǎng)，，誰(shuí)的性能好，價(jià)格優(yōu)，那我就要誰(shuí)的。當(dāng)然，我們的實(shí)際測(cè)試結(jié)果僅僅是針對(duì)我們自己的樣品和現(xiàn)場(chǎng)demo的機(jī)器而已。我們不能據(jù)此對(duì)相關(guān)品牌和相關(guān)型號(hào)做太多評(píng)判。由于具體應(yīng)用的限制、操作技巧的差異以及可能的儀器狀態(tài)的區(qū)別，我們有可能沒(méi)有給出公允的評(píng)價(jià)。但無(wú)論如何，這些訊息對(duì)我們采購(gòu)者和使用者來(lái)說(shuō)都是非常重要的。