夾芯式垂直電泳槽使用方法

那么下面上海嘉鵬科技有限公司為大家簡單介紹一下關(guān)于夾芯式垂直電泳槽使用方法:

  夾芯式垂直電泳槽使用方法：

一、組成部件

(一)裝有鉑金絲的貯液槽一對，配有冷卻裝置及電泳緩沖液流出口。 

(二)凹型橡膠框，配有玻璃板，可分別制作厚度為lmm、1.5mm的凝膠板，操作時根據(jù)需要選擇適當(dāng)厚度的玻璃板及梳子配套使用。

(三)樣品孔模具(梳子)用于電泳加樣。 

(四)固定貯液槽的螺絲桿及螺母4對，28D、30型為5對。 

(五)橡膠管五根。兩根長的用于連接冷卻水的出入口；中等長度的兩根用于連接電極緩；中液的流出口；*短的一根用于連接貯液槽間的冷卻水。

(六)導(dǎo)線1付。

● 二、使用方法

(一)清洗部件

上述部件組裝前要徹底清洗干凈。尤其是玻璃板及凹形帶槽橡膠框，必須用泡沫海綿沾少許肥皂粉或洗滌劑徹底清洗干凈。清洗后的玻璃板應(yīng)放在玻璃板支架上晾干水后方能使用。

(二)組裝電泳槽

A、1、將四只固定螺桿插到一只貯液框(半上槽)的相應(yīng)孔洞中，然后將貯液框仰放在桌上。

2、左手拿凹型槽橡膠?？?，右手的拇指與中指握住玻璃板的兩側(cè)邊緣插到橡膠?？騼?nèi) (注意手指不能接觸灌膠面的玻璃板)。

3、將帶有玻璃的橡膠?？蜃臃旁谘龇诺馁A液槽框架上，其下緣必須對齊貯液槽框下緣。

4、雙手拿另一只貯液槽框與仰放在桌上的貯液槽框相合，并使橡膠框上的凸出線位于貯液槽有機(jī)玻璃框中央。

5、裝上四只螺母，擰緊螺絲。注意擰緊螺絲時用力應(yīng)均勻，*好用雙手按斜角位置雙雙逐漸擰緊。

6、將電泳槽垂直豎起，放在桌上，帶短玻璃板的貯液槽稱上槽(陰極端)，帶長玻璃板的貯液槽稱為下槽(陽極端)，在長玻璃板與橡膠框間有一縫隙。此縫隙可用已熔化的10％瓊脂沿長玻璃板下端灌入，為防止留存氣泡，可稍抬起一端即可趕去氣泡。待瓊脂完全凝固后才能灌膠。

B、也可將槽垂直豎起，將帶有玻璃的橡膠?？蛑苯臃湃氩壑校瑢ΨQ擰緊螺絲后，用瓊脂封底邊。

(三)灌膠

1、先灌分離膠，待凝固后再灌濃縮膠。灌膠前接通冷卻水，夾緊連接上下貯液槽的兩根橡膠管。

2、用細(xì)頭滴管吸取膠液，沿長、短玻璃板中間縫隙從一端加入膠液。為防止產(chǎn)生氣泡，可稍拾起另一端(氣泡往高處走)，不斷加入膠液。若單層膠(分離膠)則加膠量約距離短玻璃板上端0.3厘米處，輕輕加少許水，雙手輕輕將梳子插入，待膠凝后就可形成凹形加樣孔。 

3、為防止漏膠，在上、下貯液槽中立即加入蒸餾水，但蒸餾水不能超過短玻璃板上緣。

4、膠凝固后即可看到樣品槽梳子與凝膠板間有一層折

射率不同的亮區(qū)。

(四)加樣

1、松開連接上、下貯液槽兩根橡皮管上的夾子，放掉槽內(nèi)的蒸餾水，待水流完后，再夾緊夾子。

2、雙手輕輕取出樣品梳子，即可看到界線清楚的加樣孔，將孔中水分吸去(注意千萬不要碰壞孔沿的字面)。

3、在上、下貯液槽中加入緩；中液，液體高度應(yīng)超過上貯液槽短玻璃板上緣。

4、用微量注射器吸取一定量的樣品加到長、短玻璃板間的凹型凝膠樣品孔內(nèi)(注意加樣動作要輕，針頭不能碰壞膠面)。

(五)電泳

一貯液槽導(dǎo)線與電泳儀的負(fù)極相連，下貯液槽導(dǎo)線與電泳儀的正極相連。檢查線路無誤，方可按照所要求的電壓電流進(jìn)行電泳。

(六)取出膠板

電泳結(jié)束，旋松螺母，取出膠框，剝出玻璃板，在兩塊玻璃板下角空隙內(nèi)，用刀片背面輕輕撬動，即可將膠面與一塊玻璃板分開，將有膠板的玻璃板平放在桌上，雙手輕輕沿凝膠底將膠片托起，放在大培養(yǎng)皿中染色，膠板經(jīng)漂洗、脫色后即可看到清晰的分離條帶。

以上就是上海嘉鵬科技有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于夾芯式垂直電泳槽使用方法。

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