我花了半個月反反復(fù)復(fù)純化蛋白，隔壁實驗室?guī)滋炀透愣耍?/h1>
日期：2024-11-23 09:45
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摘要：我花了半個月反反復(fù)復(fù)純化蛋白，隔壁實驗室?guī)滋炀透愣耍?
原本計劃做好實驗放飛自我，數(shù)據(jù)卻一直出不來，別人做蛋白純化幾天搞定，我做蛋白純化只能靠手動，半個月反反復(fù)復(fù)結(jié)果依舊讓人...
只好請教老板，如何快速搞定蛋白純化實驗（文末有法寶，親測管用?。。。?/strong>
我：「老師，我選擇的是凝膠過濾色譜法，我的目標(biāo)蛋白電荷密度并不高，上樣的量也不大，但分辨率就是不高，而且有好多成分我還是想回收一下但做不到。
」
老師：「分辨率不高這個問題，首先樣品與洗脫料液比應(yīng)該保持一致，其次要再檢查一下色譜柱裝填是否勻?qū)?/span>了，這些都會影響分辨率。層析液全收集這個事兒是這樣，咱現(xiàn)在的儀器通路是有限的，只能收集這么多，你就盡量挑你關(guān)注的來吧。」
我：「行吧，那實驗過程中會出現(xiàn)渾濁現(xiàn)象，這個是什么原因呢？」
老師：「有可能是你實驗的蛋白自身不穩(wěn)定，需要檢查緩沖體系是否適宜，環(huán)境是否溫度太高，你可以加入肌氨酸鈉，迅速使蛋白變性，渾濁現(xiàn)象會消除。」
我：「老師，還有，還有問題，這個儀器鎳柱好像堵了，每次開機要啟動好久，基線還漂移的很過分，平衡的時間越來越久，一上午都耗在等機子上了?！?
老師：「這個機器的鎳柱是剛換的，如果你樣品雜質(zhì)顆粒處理的比較好，液料比也合適的話，就要看純化上清時蛋白質(zhì)有沒有產(chǎn)生絮狀沉淀，盡快加入 DTT 還原。至于基線花長時間都不平的問題啊，同學(xué)們給我反映很多次了，但儀器用的太久了，我也很無奈。」
我：「老師，我以前一直以為是我沒有找到軟件，怎么自動換算 AU 值，結(jié)果發(fā)現(xiàn)大家都是手動自己算的?！?
老師：「咱的這臺儀器都『老當(dāng)益壯』這么久了，電腦也卡，啟動也慢，啥都得手動，但是換一臺全自動進口的實在是太貴，公共實驗室地方緊緊巴巴，便宜一點的吧，全是手動也不劃算，跟學(xué)院申請了很多次了，經(jīng)費也有限，確實挺為難的?！?
我：老師還是厲害啊，但是 3 天要搞定實驗，實在有點為難，要如何才能搞定呢？
老師：雖然我平時扣扣搜搜的，那也是沒辦法，這次我給你們特別準(zhǔn)備了一臺全自動蛋白純化儀，完全滿足你們?nèi)粘Ｊ褂?，勝任常?guī)蛋白純化~
我：全自動?。?！
老師：你趕緊掃下二維碼去試用吧，用的好就買，這臺儀器費用還可以，為師還有些經(jīng)費能支持。
這臺能入我老板法眼的蛋白純化儀究竟有何來歷：
Blupadstart 蛋白純化系統(tǒng)
Blupadstart 蛋白純化系統(tǒng)，小巧緊湊的一體化設(shè)計，能夠開展各種常用的純化技術(shù)，如親和層析、離子交換層析、脫鹽和緩沖液交換，以及凝膠過濾，通過 Blupadstart、預(yù)定義模板或自定義方法實現(xiàn)全自動多蛋白純化，操作界面簡潔，流程直觀，滿足科研需求的同時讓一切簡單起來：
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我：「行吧，那實驗過程中會出現(xiàn)渾濁現(xiàn)象，這個是什么原因呢？」
老師：「有可能是你實驗的蛋白自身不穩(wěn)定，需要檢查緩沖體系是否適宜，環(huán)境是否溫度太高，你可以加入肌氨酸鈉，迅速使蛋白變性，渾濁現(xiàn)象會消除。」
我：「老師，還有，還有問題，這個儀器鎳柱好像堵了，每次開機要啟動好久，基線還漂移的很過分，平衡的時間越來越久，一上午都耗在等機子上了?！?
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我：老師還是厲害啊，但是 3 天要搞定實驗，實在有點為難，要如何才能搞定呢？
老師：雖然我平時扣扣搜搜的，那也是沒辦法，這次我給你們特別準(zhǔn)備了一臺全自動蛋白純化儀，完全滿足你們?nèi)粘Ｊ褂?，勝任常?guī)蛋白純化~
我：全自動?。?！
老師：你趕緊掃下二維碼去試用吧，用的好就買，這臺儀器費用還可以，為師還有些經(jīng)費能支持。
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