凝膠成像工作原理及使用方法
凝膠成像系統(tǒng)是,樣品在電泳凝膠或者其他載體上的遷移率不樣,以標(biāo)準(zhǔn)品或者其他的替代標(biāo)準(zhǔn)品相比較就會(huì)對(duì)未知樣品作個(gè)定性分析。這個(gè)就是圖像分析系統(tǒng)定性的基礎(chǔ)。根據(jù)未知樣品在圖譜中的位置可以對(duì)其作定性分析,就可以確定它的成份和性質(zhì)。
樣品對(duì)投射或者反射光有部分的吸收,從而照相所得到的圖像上面的樣品條帶的光密度就會(huì)有差異。光密度于樣品的濃度或者質(zhì)量成線性關(guān)系。根據(jù)未知樣品的光密度,通過于已知濃度的樣品條帶的光密度指相比較就可以得到未知樣品的濃度或者質(zhì)量。這就是圖像分析系統(tǒng)定量的基礎(chǔ)。采用新技術(shù)的紫外透射光源和白光透射光源使光的分布更加均勻,大限度的消除了光密度不均造成的對(duì)結(jié)果的影響。
凝膠成像使用方法:
第: 打開電腦,啟動(dòng)凝膠分析軟件,進(jìn)進(jìn)用戶界面。
第: 打開采集凝膠成像圖像的暗箱裝置電源開關(guān),放進(jìn)凝膠,打開紫外光源或白光光源,將采集裝置與電腦上采集卡相連,然后選擇“文件”菜單中的“圖像采集”或工具欄的“圖像采集”按鈕,出現(xiàn)圖像窗口:“開始采集”、“停止采集”、“采集圖像”等。假如圖像不清楚,可以調(diào)節(jié)暗箱上的變焦鏡,使之清楚。可直接將圖像保存起來,也可通過“圖像處理”對(duì)圖像進(jìn)行旋轉(zhuǎn)、裁剪、濾波、調(diào)節(jié)對(duì)比度……方面的處理。
第三: 對(duì)讀進(jìn)的電泳凝膠圖像,可以啟動(dòng)電泳凝膠分析系統(tǒng)。在“功能選擇”菜單中選擇“電泳凝膠”或在工具欄上的“電泳凝膠”工具,將出現(xiàn)泳道分析工具欄,并在“圖像顯示”子窗口中出現(xiàn)個(gè)紅色的矩形框。還可進(jìn)進(jìn)“條帶分析”系統(tǒng),對(duì)條帶 進(jìn)行編號(hào),對(duì)條以上的條帶進(jìn)行比較。
第四: 采集圖像結(jié)束后,封閉暗箱電源開關(guān),從暗箱中取出凝膠,并將玻璃板清洗干凈。