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常規(guī)組織樣本核酸（DNA/RNA）提取純化

日期：2024-11-26 15:38

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摘要： QIAamp DNA Kits —— 純化基因組 DNA、線粒體 DNA、**、寄生蟲或病毒DNA 20 分鐘內(nèi)快速純化品質(zhì)，產(chǎn)量，即用型 DNA（見圖 20）多種規(guī)格可選擇：Mini Kit 可處理 25 mg...

QIAamp DNA Kits
—— 純化基因組 DNA、線粒體 DNA、**、寄生蟲或病毒DNA

20 分鐘內(nèi)快速純化品質(zhì)，產(chǎn)量，即用型 DNA（見圖 20）
多種規(guī)格可選擇：Mini Kit 可處理 25 mg 組織，Micro Kit 可處理小于 10 mg 組織
完全去除污染物和抑制劑
可在 QIAcube 上進行自動化純化

表1 QIAamp DNA Mini Kit純化各類樣本的核酸產(chǎn)量

樣品	用量	總核酸的量（μg）*	DNA 的量（μg）?
血液	200 μl	4–12	4–12
白膜層	200 μl	25–50	25–50
細胞	106	20–30	15–20
肝臟	25 mg	60–115	10–30
大腦	25 mg	35–60	15–30
肺	25 mg	25–45	5–10
心臟	25 mg	15–40	5–10
腎臟	25 mg	40–85	15–30
脾臟	10 mg	25–45	5–30

* 核酸未經(jīng)RNase處理。
? 核酸經(jīng)RNase處理?？偤怂岬牧浚é蘥）*

圖1 純化長達50 kb的基因組DNA
QIAamp Kits從圖示來源的樣本（每泳道3 μg）中純化獲得的DNA長度

RNeasy Kit —— 常規(guī)組織或細胞 RNA 純化

從細胞、組織或酵母中純化至總 RNA
數(shù)分鐘內(nèi)快速純化得到品質(zhì)總 RNA
即用型 RNA 在各種下游應用中表現(xiàn)良好
無需有機試劑或乙醇沉淀步驟

RNeasy Kits 四種規(guī)格（Micro, Mini, Midi, Maxi），RNeasy 離心柱的結(jié)合能力分別為45 μg, 100 μg, 1 mg 和 6 mg 的 RNA。

表2 RNeasy Mini Kit從各類樣本中純化得到的總RNA產(chǎn)量

樣本來源	起始材料	平均產(chǎn)量（μg）
動物細胞 LMH HeLa COS-7 **細胞（未受激）	1 x 106 1 x 106 1 x 106 1 x 106	12 15 35 0.5
小鼠組織肝肺脾	10 mg 10 mg 10 mg	40 10 35
*細胞 S. cerevisiae*	1 x 107	25

圖2 從多種樣本中純化品質(zhì)RNA。

使用RNeasy Maxi Kit純化的總RNA的甲醛瓊脂糖凝膠電泳和northern印跡。從各種來源的樣本中分離總RNA（10 μg）上樣至各泳道。所有組織均來源于小鼠。酵母：Saccharomyces cerevisiae；E. coli菌株：HB101。32P標記的探針識別的（G）GAPDH；（E）翻譯延長因子EF-1α；和（O）外膜蛋白A序列。（E和O分別由瑞士巴塞爾大學的P. Philippsen和德蒂賓根馬克斯-普朗克生物學研究所的U. Henning。）B. subtilis未采用探針檢測。M：0.24–9.5 kb RNA分子量標準。胚胎、Huh7和HeLa細胞泳道中的7.5 kb條帶（圖示）為核前體RNA。

表3 常規(guī)組織，細胞核酸純化產(chǎn)品列表：

產(chǎn)品名稱	貨號
QIAamp DNA Mini Kit (50)	51304
QIAamp DSP DNA Mini Kit (50)	61304
RNeasy Mini Kit (50)	74104
RNeasy Mini Kit (250)	74106
RNeasy Plus Mini Kit (50)	74134
RNeasy Plus Universal Midi Kit (10)	73442
RNeasy Midi Kit (10)	75142
RNeasy Midi Kit (50)	75144
RNeasy Maxi Kit (12)	75162

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